Активность пероксидазы
15.11.2014
Реактивы: 0,001 н. раствор индигокармина, 2 н. раствор серной кислоты, 0,001 н. раствор перманганата, 0,2 н. раствор уксусной кислоты, 0,2 н. раствор уксуснокислого натрия, 0,2 н. раствор перекиси водорода, дистиллированная вода.
Приборы: химические пробирки, секундомер.
Приготовление реактивов:
1. Раствор индигокармина: 10 мл 0,001 н. раствора индигокармина подкисляют 5 мл 2 н. раствора серной кислоты и титруют свежеприготовленным 0,001 н. раствором перманганата калия до перехода синей окраски через зеленую в чисто-желтую (раствор не стойкий).
2. Ацетатный буферный раствор с pH 4,7. Смешивают равные объемы 0,2 н. уксусной кислоты и 0,2 н. раствора уксуснокислого натрия.
Ход определения.
В пробирку налить 2 мл ацетатного буферного раствора и добавить 3 мл разведенной крови (0,02 мл крови в 20 мл дистиллированной воды) и 2 мл дистиллированной воды, размешать. Прилить 1 мл раствора индигокармина и 2 мл 0,2 н, раствора перекиси водорода и смешать. Момент внесения перекиси и есть начало реакции, которую отмечают с помощью секундомера. Как только синий раствор перейдет через зеленый в желто-розовый, реакцию окисления считают законченной (отсчет по секундомеру выражают в секундах).
