Определение глюкозы в безбелковом фильтрате крови по цветовой реакции с анилином

15.11.2014

Реактивы: анилин, ледяная уксусная кислота, ТХУ, тиомоче-вина (бензойная кислота), глюкоза.
Приборы: ФЭК 56, водяная баня, пробирки химические и центрифужные, термометр на 150°С, штатив для пробирок.
Приготовление реактивов:
1. 20%-ный раствор ТХУ - 20 мл ТХУ и 80 мл дистиллированной воды.
2. Тиомочевина - 0,2 г бензойной кислоты растворяют в 99,8 мл воды, подогревая раствор.
3. Ортотолуидиновый реактив - в 94 мл ледяной уксусной кислоты растворяют 0,15 г тиомочевины и добавляют 6 мл анилина. Стоек при хранении в холодильнике.
4. Стандартный раствор глюкозы: 50 мг глюкозы растворяют в 100 мл 0,2%-ном растворе бензойной кислоты.
Ход определения.
Безбелковый фильтрат крови получают путем смешивания и центрифугирования равных объемов крови и 20% ТХУ. Дальнейшее определение ведется по табл. 5.

Определение глюкозы в безбелковом фильтрате крови по цветовой реакции с анилином

Все пробирки помещают в кипящую водяную баню на 8 мин., после чего охлаждают до комнатной температуры под водопроводной водой. Фотоколометрируют при длине волны 590-655 нм. Расчет результатов ведется по формуле:

Соп = Сст х Еоп / Ест

где: Соп - концентрация глюкозы в пробе, мг%;
Сст - концентрация глюкозы в стандарте (50 мг%);
Еоп - оптическая плотность пробы;
Ест - оптическая плотность стандарта.