Определение общего азота в крови методом Къельдаля

15.11.2014

Реактивы: серная кислота концентрированная, катализатор, 0,1 н. щелочь (натрий, калий), 0,1 н. серная кислота, 33-40% щелочь, тальк или пемза, индикатор Ташира.
Приборы: пипетка на 1 мл, колбы Къельдаля на 100, 250, мерные цилиндры на 10, 50 мл, индикаторная бумага.
Приготовление реактивов:
1. Индикатор Ташира: основной раствор - 40 мл 0,1%-ного раствора метилрота (спиртовый) и 10 мл 0,1%-ного метилблау.
Рабочий раствор -1 объем основного раствора : 1 объем спирта : 2 объема дистиллированной воды.
2. Катализатор (селен, перекись водорода или смесь сернокислого калия, сернокислой меди и селена в соотношении 100:10:5).
Ход определения.
1. 1 мл крови осторожно вносим в колбу Къельдаля. Добавляем 10-15 мл серной кислоты концентрированной и катализатор.
2. Пробу ставим на слабый, а затем на сильный огонь. Сжигание закончить, когда жидкость станет прозрачной.
3. По окончании сжигания стенки колбы отмыть водой и еще раз прокипятить до обесцвечивания.
4. В приемную колбу наливаем точно отмеренное количество 0,1 н. серной кислоты (обычно 10-20 мл) и несколько капель индикатора Ташира.
5. В отгонную колбу смываем пробу, добавляем 30-40 мл щелочи и ведем отгонку 15-30 минут. Окончание отгонки проверяем индикаторной бумажкой, реакция должна быть нейтральной.
6. Аммиак с парами воды попадает в приемную колбу. Затем титруем 0,1 н. щелочью до перехода окраски от фиолетовой до зеленой.
Расчет общего азота ведут по формуле:

X = (А - Б) х 1,4 х 100;

где: А - количество мл 0,1 н. серной кислоты, налитой в приемник;
Б - количество мл 0,1 н. щелочи, израсходованной на титрование;
1,4 - количество мл азота, которое связывается с 1 мл серной кислоты.
X - количество мг общего азота в 100 мл крови.


Добавить комментарий
Имя:*
E-Mail:
Комментарий: