Определение титра нормальных антител

15.11.2014

Реактивы: 0,5%-ный раствор хлорида натрия, физиологический раствор, бактериальная взвесь кишечной палочки.
Приборы: центрифуга, центрифужные и химические пробирки, пипетки на 1 и 10 мл, термостат.
Ход определения.
Сыворотку, необходимую для реакции, получают путем центрифугирования 0,5 мл крови при 1500 об. в мин. Разведения сыворотки готовят: в одну пробирку наливают 1,88 мл 0,5%-ного раствора хлорида натрия и 0,2 мл сыворотки (полученное разведение 1:10). Затем в 6 пробирок наливают по 1 мл 0,5%-ного раствора хлорида натрия. Из пробирки, содержащей разведение сыворотки 1:10, отбирают 1 мл и вносят в 1 пробирку с чистым физиологическим раствором, перемешивают, отбирают из нее 1 мл и вносят его в следующую пробирку (2) и так далее аналогичным образом до последней пробирки, из которой после перемешивания отбирают 1 мл с целью достижения равновесия объемов во всех исследуемых пробирках.
В каждую из пробирок вносят бактериальную взвесь, которую готовят следующим образом: из суточной культуры кишечной палочки 10-миллиардную взвесь бактерий. В пробирки с указанным разведением сыворотки вносят по 2 капли полученной взвеси бактерий с последующим выдерживанием в термостате при 37°С в течение 24 часов. После этого определяют титр нормального агглютинина по последней пробирке, в которой еще обнаруживается агглютинат.


Добавить комментарий
Имя:*
E-Mail:
Комментарий: