Определение общих липидов по методу А.Ф. Криницкого

15.11.2014

Реактивы: смесь Блюра (3 части 96%-ного перегнанного этилового спирта и 1 часть серного эфира), 1 н. раствор серной кислоты, животный жир (топленое сливочное масло), холестерин.
Приборы: ФЭК- нефелометр, пробирки с притертыми пробками (предварительно обезжиренные), пробирки химические (предварительно обезжиренные), фильтровальные обезжиренные бумажки, высушенные, размером 2x8 см, пипетки на 0,1; 2; 5 и 10 мл.
Ход определения.
0,1 мл сыворотки крови равномерно наносят с помощью микропипетки на обезжиренную фильтровальную бумажку. Высушивают при комнатной температуре. Затем бумажку разрезают на кусочки, переносят в пробирку и заливают 4 мл смеси Блюра, закрывают плотно пробкой и оставляют стоять в течение 2 суток. После экстракции из пробирки берут 2 мл экстракта, что соответствует 0,05 мл сыворотки крови и переносят в химическую пробирку, добавляют 10 мл 1 н. раствора серной кислоты. Раствор липидов переходит в эмульсию. Через час степень мутности эмульсии измеряют нефелометром.
Используют 10 мм кювету и синий светофильтр. В параллельную кювету помещают раствор, состоящий из 2 мл смеси Блюра и 10 мл 1 н. раствора серной кислоты. Перед работой строят колибровочную кривую, по которой определяют количество липидов. Колибровочную кривую строят по смеси животного жира и холестерина в отношении 3:1. В качестве животного жира берут топленое сливочное масло. Животный жир и холестерин должны быть предварительно высушены до постоянной массы. Из них приготовляют 100 мг% раствор в смеси Блюра.
Из приготовленного раствора готовят серию разведений по схеме, представленной в табл. 6.

Определение общих липидов по методу А.Ф. Криницкого


Добавить комментарий
Имя:*
E-Mail:
Комментарий: